治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制

作者：马茹; 郭子嘉; 陶庆文; 鄢泽然; 刘振权^*; 徐愿^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(05): 46-54.

• 类风湿关节炎
• 治尪汤
• 核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)通路
• 骨破坏

目的:探究治尪汤联合甲氨蝶呤改善胶原诱导关节炎模型(CIA)大鼠的骨破坏作用及机制。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,甲氨蝶呤组(1.5 mg·kg-1),甲氨蝶呤+治尪汤低(40.8 g·kg-1),高(102.0 g·kg-1)剂量组。除正常组外,其余大鼠分别于第1,7天尾部注射浓度为2 g·L-1的Ⅱ型胶原乳剂50μL建立CIA模型;第8天开始连续给药21 d,每7 d检测1次体质量、足趾厚度,进行关节炎指数(AI)评分,酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1β(IL-1β)含量,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测踝关节破骨细胞的数量,免疫组化(IHC),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测踝关节核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL),骨保护素(OPG)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P<0.01),足趾厚度显著增加(P<0.01),踝关节AI评分显著增加(P<0.01),血清TNF-α,IL-6,IL-1β含量显著升高(P<0.01),踝关节破骨细胞数量显著增加(P<0.01),踝关节RANKL mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),OPG mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05),RANKL/OPG显著升高(P<0.01)。与模型组比较,甲氨蝶呤+治尪汤低、高剂量可改善大鼠体质量,降低足趾厚度,AI评分,RANKL mRNA和蛋白表达并增加OPG mRNA和蛋白表达,使RANKL/OPG降低(P<0.05,P<0.01),且甲氨蝶呤+治尪汤高剂量效果最好,甲氨蝶呤+治尪汤低剂量次之,甲氨蝶呤再次之。结论:治尪汤联合甲氨蝶呤能更好地改善类风湿关节炎的骨破坏,可能是通过抑制RANKL/OPG通路实现的,本研究为中西医结合方案治疗类风湿关节炎骨破坏提供了实验基础。

• 单位
  北京中医药大学; 内蒙古医科大学; 中日友好医院