热休克预处理对化疗环境下骨髓间充质干细胞存活率的影响及机制

作者：李欣然; 王清; 汪庆如; 谢嘉欣; 朱洪磊; 周曼萍; 肖苑玲; 付霞霏

来源：重庆医科大学学报, 2021, 46(10): 1147-1152.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.002802

• 热休克
• 骨髓间充质干细胞
• 化疗
• 热休克蛋白
• 自噬

目的:探索热休克预处理(heat shock pretreatment,HSP)对化疗微环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的影响及其潜在机制。方法:探索HSP最佳条件,往热休克预处理BMSCs(heat shock pretreated bone marrow mesenchymal stem cells,HS-MSCs)培养基中加入顺铂,通过CCK-8检测细胞增殖率,Hoechst33342/PI测定存活率,流式细胞仪检测凋亡率。使用Western blot检测不同时间点HS-MSCs热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)、Hsp90、自噬相关蛋白Beclin1和LC3B的表达。通过透射电镜观察自噬小体数量。结果:加入顺铂后,热休克模型组凋亡率明显低于模型组。此外,热休克模型组增殖速率较模型组增加,而表达亮蓝色/暗红色荧光的比例则低于模型组。HS-MSCs内Hsp70和Hsp90的表达随时间推移逐渐上调,并在48 h后达峰值。同时,细胞内自噬小体减少、Beclin1表达降低、LC3BⅡ/LC3BⅠ比值下降。结论:HSP能够提高化疗微环境下BMSCs的存活与抗凋亡能力,其作用可能与HSP增强Hsp70及Hsp90的表达、减弱自噬水平有关。

• 单位
  南方医科大学珠江医院; 香港大学深圳医院