摘要
目的探讨大黄素-8-O-β-D-葡萄糖甙(EG)对人卵巢癌细胞系SKOV3细胞凋亡及Bcl-2家族蛋白表达的作用。方法取对数生长期的SKOV3细胞, 分为对照组和实验组, 实验组用不同浓度的EG分别处理24、48及72 h, 采用噻唑蓝(MTT)法测定EG对SKOV3细胞增殖的影响;采用Hoechst染色观察SKOV3细胞的形态学变化;不同浓度EG处理SKOV3细胞48 h后, 分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期;免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶caspase-3、-9, Bcl-2和(或)Bax蛋白表达情况。结果 EG(20、40及80 mg/L)能剂量和时间依赖性地降低SKOV3细胞的活力, 20、40及80 mg/L的EG作用SKOV3细胞48 h后, 细胞凋亡率显著增加, 分别为23.8%、35.5%及59.6%, 明显高于对照组(2.3%);实验组SKOV3细胞caspase的活性形式cleaved caspase表达量显著增加;促凋亡蛋白Bax表达量升高, 而抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低, 呈剂量依赖性。结论 EG能抑制SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡, 其作用机制可能与增加细胞caspase活性、下调Bcl-2基因的表达及上调Bax基因有关。
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单位禹城市人民医院