天名精根提取物调控TLRs信号抑制RAW264.7细胞炎症的研究

作者：乐翊飞; 汪俊成; 唐利华; 吴尹洁; 徐扬; 王萃; 卢德赵^*

来源：浙江中医药大学学报, 2019, 43(04): 360-367.

DOI：10.16466/j.issn1005-5509.2019.04.016

• 天名精
• RAW264.7
• 脂多糖
• 金黄色葡萄球菌
• 中药提取物
• 炎症

[目的]阐明天名精根提取物对RAW264.7细胞炎症反应的影响及其机制。[方法]采集野生天名精全株,处理得天名精根粉末,制备天名精根乙醇和石油醚提取物,并以高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测其中主要成分;采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、灭活的金黄色葡萄球菌(heat-inactivated preparations of Staphylococcus aureus pathogens,SAC)刺激RAW264.7细胞,构建体外炎症模型。以MTT法检测细胞增殖,qPCR检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Toll样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR-2)、TLR-4、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response 88,MyD88)、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)m RNA表达,Western blot检测NF-κB p65蛋白表达。[结果]与正常对照组比较,LPS或SAC刺激后RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达增加(P<0.01),NF-κB蛋白与mRNA表达增加(P<0.01);LPS刺激后TLR-4、MyD88 m RNA表达增加(P<0.01,P<0.05),SAC刺激后TLR-2、MyD88 m RNA表达增加(P<0.01)。天名精根提取物干预后,与LPS组或SAC组比较,RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达减低(P<0.01),同时NF-κB m RNA和NF-κB p65蛋白表达也减低(P<0.01);TLR-4和MyD88 m RNA表达明显低于LPS组(P<0.01,P<0.05),TLR-2和MyD88 mRNA表达表达明显低于SAC组(P<0.01,P<0.05)。[结论]天名精根提取物可以抑制由LPS和灭活的金黄色葡萄球菌引起的RAW264.7细胞炎症反应,其机制可能与抑制TLRs-NF-κB信号通路有关。

• 单位
  浙江中医药大学; 生命科学学院