抑制Akt磷酸化对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导表皮生长因子受体/KRAS野生型非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的影响

作者：邓立力; 邓洪滨; 韩红霞; 李逸文; 郭扬

来源：肿瘤研究与临床, 2016, 28(03): 154-157.

• 癌,非小细胞肺
• Akt
• 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
• 细胞凋亡

目的探讨抑制Akt磷酸化对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)引发的表皮生长因子受体(EGFR)/KRAS野生型非小细胞肺癌(NSCLC)H1299细胞凋亡的影响。方法采用Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)法分析TRAIL对H1299细胞凋亡的作用;Western blot检测TRAIL作用后细胞Akt、p-Akt蛋白的表达。使用PI3K特异性抑制剂LY294002处理H1299细胞,用Annexin V-FITC/PI法分析其对TRAIL诱导细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞Akt、P-Akt蛋白表达的变化。结果 H1299细胞对TRAIL引起的凋亡呈现耐受。当TRAIL质量浓度为100ng/ml时,实验组细胞凋亡率高于对照组[(15.06±1.29)%比(3.56±0.50)%,t=66.953,P=0.000]。当TRAIL质量浓度增加到500 ng/ml时,与100 ng/ml TRAIL处理组相比,差异无统计学意义[(18.65±2.09)%比(15.06±1.29)%,t=2.423,P=0.136]。TRAIL以时间依赖的方式上调H1299细胞的P-Akt表达水平。用LY294002预处理细胞后,TRAIL激发的Akt磷酸化被抑制到基线水平,同时细胞凋亡率明显高于仅TRAIL处理组[(41.65±4.62)%比(15.82±0.61)%,t=39.028,P=0.001]。结论 TRAIL引发的Akt磷酸化激活可抵抗TRAIL引起的凋亡反应。抑制Akt磷酸化可明显增强EGFR/KRAS野生型NSCLC细胞对TRAIL引起的凋亡反应的敏感性。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第一医院; 哈尔滨医科大学附属第二医院