摘要
目的:研究OmpR对伤寒沙门菌侵袭力的影响及相关分子机制。方法:利用空载体对照株(WT-pBAD33)、ompR缺陷株(ΔompR-pBAD33)和ompR回补株(C-ΔompR)进行HeLa细胞侵袭实验,探究伤寒沙门菌OmpR对于HeLa细胞侵袭力的影响。进一步用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)、凝胶阻滞实验(EMSA)分析伤寒沙门菌OmpR对侵袭相关基因iagA、invF、prgH的调控作用。结果:成功制备伤寒沙门菌C-ΔompR。在HeLa细胞侵袭实验中,ΔompR-pBAD33侵袭力显著低于WT-pBAD33(P <0.01),而C-ΔompR侵袭能力较ΔompR-pBAD33明显升高(P <0.01); qRTPCR结果显示,ΔompR-pBAD33中侵袭相关基因iagA、invF、prgH的转录水平较WT-pBAD33明显下降(P <0.01); EMSA结果表明,OmpR可直接与prgH基因启动子区域结合,与iagA和invF基因启动子区域未有结合。结论:OmpR通过直接调节prgH和间接调节iagA、invF增加侵袭相关基因的表达,从而增强伤寒沙门菌对上皮细胞的侵袭力。
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