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摘要
目的 观察人肝细胞（L02）氧化应激模型中热休克蛋白90α（heat shock protein 90α, Hsp90α）和相关底物蛋白细胞周期蛋白B1（Cyclin B1）的蛋白水平变化，以及Hsp90α表达下调后对Cyclin B1表达的影响，明确Hsp90α对Cyclin B1功能的影响，为氧化应激相关的肝脏疾病防治提供新思路。方法 以200μM H2O2建立氧化应激L02细胞损伤模型；通过CCK-8法观察氧化应激对细胞存活的影响，比色法测定细胞内谷胱甘肽（glutathione, GSH）含量，流式细胞术检测细胞周期，免疫印迹法检测氧化应激对细胞内Hsp90α及Cyclin B1蛋白水平的影响。结果 随着氧化应激刺激时间的延长，GSH含量逐渐减少，抗氧化能力不断降低。从6 h开始，胞内GSH水平较对照组明显下降（均P2O2对L02细胞增殖的抑制程度增强；氧化应激后细胞周期检测点G2/M期阻滞明显；氧化应激导致胞内Hsp90α蛋白水平先增加后降低，在刺激24 h时Hsp90α表达出现明显下降，Cyclin B1蛋白水平则在24 h明显增加，与对照组相比，差异有统计学意义（均P<0.05）。结论 氧化应激可动态影响细胞内Hsp90α及CyclinB1蛋白表达水平；氧化应激下，Hsp90α表达降低可影响与G2/M期调节有关的底物蛋白Cyclin B1水平，Hsp90α对Cyclin B1功能维持起保护性作用。
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