摘要
目的研究大鼠脑、肝脏组织3种RNA相对表达量与死亡时间的关系,比较两组织用于死亡时间推断的适用性。方法将48只Wistar大鼠随机分为6组,断颈处死,分别于死后0、24、48、72、120、168 h取大鼠脑皮质及肝右外叶。提取脑、肝组织总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)技术检测两组织中miR(脑特异性miR-124、肝特异性miR-122)及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、β-肌动蛋白(β-actin)mRNA的循环阈值(cyclic threshold,Ct)。用Best Keeper程序筛选内参,对目的RNA的Ct值进行2-ΔΔCt转换,用SPSS及Graph Pad软件对其进行单因素方差分析,并对ΔCt值进行曲线回归分析。结果 miR-124和miR-122分别为脑、肝组织的内参。脑组织GAPDH、β-actin mRNA的相对表达量在死后72 h内逐渐增加,并于死后72 h达到峰值,之后逐渐下降(P<0.05);而肝GAPDH、β-actin mRNA的相对表达量从死后48 h开始逐渐下降(P<0.05)。所有分子的最适回归模型均为三次模型,且肝组织的相关系数r大于脑组织。结论大鼠脑、肝组织中GAPDH、β-actin mRNA的相对表达量与死亡时间具有相关性,肝组织比脑组织更适用于死亡时间推断。
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单位青海省公安厅; 青海大学