长链非编码RNA肿瘤易感基因11通过靶向微小RNA3194-3p/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路调控膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的研究进展

作者：徐哲^*; 王照; 罗子靖

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(06): 1023-1026.

• 肿瘤易感基因
• 微小RNA
• 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路
• 膀胱癌

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感基因11(CASC11)通过靶向微小RNA-3194-3p/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(miR-3194-3p/PI3K/Akt)通路对膀胱癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及其作用机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测膀胱上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞J82、T24、5637中CASC11和miR-3194-3p的表达。然后选择T24细胞进行研究, 将细胞分为阴性对照(si-NC)、干扰CASC11(si-CASC11)转染至细胞内, 记为si-NC组、si-CASC11组, 将干扰CASC11和miR-3194-3p对照(si-CASC11和anti-miR-NC)、干扰CASC11和抑制miR-3194-3p(si-CASC11和anti-miR-3194-3p)共转染至细胞, 记为si-CASC11+anti-miR-NC组、si-CASC11+anti-miR-3194-3p组。通过采用RT-qPCR检测CASC11和miR-3194-3p的表达;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、基质金属蛋白酶-14(MMP-14)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphoinositide-3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase, Akt)相关蛋白的表达;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶实验检验CASC11和miR-3194-3p的关系。两组间比较采用t检验, 多组件比较采用单因素方差分析, 组内间比较采用SNK-q检验。结果在膀胱癌细胞J82、T24、5637中CASC11表达(2.67±0.25比0.98±0.06, 3.52±0.38比0.98±0.06, 3.17±0.29比0.98±0.06, F=51.591, P<0.05)明显高于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1, 差异有统计学意义(P<0.05);miR-3194-3p表达(0.52±0.06比1.03±0.08, 0.36±0.03比1.03±0.08, 0.46±0.04比1.03±0.08, F=85.848, P<0.05)明显低于正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1, 差异有统计学意义(P<0.05);干扰CASC11可以明显降低细胞的增殖、迁移和侵袭能力, 促进细胞的凋亡。CASC11调控miR-3194-3p的表达, 抑制miR-3194-3p部分回复干扰CASC11对膀胱癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。干扰CASC11可以降低膀胱癌细胞p-PI3K(0.37±0.03比0.98±0.07, t=24.049, P<0.05)、p-Akt蛋白的表达(0.42±0.04比1.01±0.08, t=19.789, P<0.05)差异有统计学意义(P<0.05);抑制miR-3194-3p能降低干扰CASC11对膀胱癌细胞p-PI3K(0.69±0.06比0.40±0.04, t=12.065, P<0.05)、p-Akt(0.72±0.06比0.39±0.03, t=14.758, P<0.05)蛋白的表达, 差异有统计学意义。结论 CASC11通过靶向miR-3194-3p/PI3K/Akt通路抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭, 并诱导细胞的凋亡。

• 单位
  河北医科大学第一医院