肝癌细胞蛋白磷酸酶2A催化亚基在过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导急慢性肝癌细胞损伤模型中的表达及其对肝癌细胞的影响

作者：杨成雷; 黄燊; 莫来铭; 唐深; 李习艺; 张志明^*

来源：临床肝胆病杂志, 2019, 35(12): 2730-2735.

• 癌,肝细胞
• 过氧化氢
• 黄曲霉毒素B1
• 蛋白质磷酸酶2
• HepG2细胞
• Huh-7细胞

目的探讨过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导肝癌细胞急慢性损伤后蛋白磷酸酶2A催化亚基(PP2A)的表达情况。方法采用不同浓度的过氧化氢(0、50、100、200、400、800μmol/L)或黄曲霉毒素B1(0、1. 25、2. 5、5、10、20、40μmol/L)诱导肝癌细胞(HepG2/Huh-7细胞) 2、4、6、8和24、48 h后,倒置显微镜观察细胞形态,刃天青实验检测肝癌细胞活性,Western Blot检测去甲基化PP2A催化亚基C(PP2Ac)和总PP2Ac蛋白的表达情况。两组间比较用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析和析因设计资料两因素方差分析。结果 HepG2/Huh-7细胞对过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导敏感,随着过氧化氢和AFB1浓度升高或孵育时间延长,细胞形态发生变化,数量减少。在2、4、6和8 h时间段,100μmol/L及以上浓度的过氧化氢诱导HepG2/Huh-7细胞后,随着过氧化氢浓度的升高,HepG2/Huh-7细胞活性逐渐下降,不同浓度过氧化氢与对照组(0μmol/L)比较,差异均有统计学意义(P值均<0. 05)。在4个不同时间段,两株细胞IC50用两因素方差分析比较,差异均无统计学意义(P值均> 0. 05)。在24、48 h时间段,2. 5μmol/L及以上浓度黄曲霉毒素B1诱导HepG2/Huh-7细胞后,随着浓度的升高,HepG2/Huh-7细胞活性逐渐下降,不同黄曲霉毒素B1浓度与对照组(0μmol/L)相比,差异均有统计学意义(P值均<0. 05)。在两个不同时间段,两株细胞IC50用两因素方差分析比较,差异均无统计学意义(P值均> 0. 05)。用200μmol/L过氧化氢诱导HepG2 2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义(t值分别为-5. 553、-2. 990,P值分别为0. 005、0. 040); 400μmol/L过氧化氢诱导Huh-7细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义(t值分别为0. 073、-5. 149,P值分别为0. 002、0. 007)。用10μmol/L黄曲霉毒素B1诱导HepG2细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义(t值分别为-4. 561、-5. 788,P值分别为0. 010、0. 004); 20μmol/L黄曲霉毒素B1诱导Huh-7细胞2 h后,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达水平与对照组相比升高,差异均有统计学意义(t值分别为-5. 120、-6. 144,P值分别为0. 007、0. 004)。结论过氧化氢和黄曲霉毒素B1诱导肝癌细胞急慢性损伤后细胞形态发生变化,细胞活性降低,总PP2Ac和去甲基化PP2Ac蛋白表达升高。

• 单位
  公共卫生学院; 基础医学院; 广西医科大学; 广西医科大学附属肿瘤医院