田蓟苷调控p53/NOX4信号通路抗缺氧复氧诱导的心肌细胞损伤的机制研究

作者：袁勇; 李雅琪; 黄川生; 赵云丽; 曹文疆; 王新春^*

来源：中国医院药学杂志, 2023, 1-10.

• 田蓟苷
• H9c2心肌细胞
• 缺氧/复氧
• p53/NOX4通路
• 氧化应激
• 凋亡

目的：探究田蓟苷(Tilianin，Til)预处理对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞的保护作用。方法：体外培养H9c2心肌细胞，将其分为正常组(Normal)、模型组(H/R)、田蓟苷组(Til)、p53激动剂组(Nutlin-3a)、田蓟苷+p53激动剂组(Til+Nutlin-3a)，缺氧12 h复氧6 h建立H/R模型。CCK-8法测H9c2细胞活力，化学荧光法测ROS水平，试剂盒测LDH、MDA、SOD水平，JC-1法测线粒体膜电位(ΔΨm)，Annexin-FITC/PI和Fluo-3 AM分别结合流式细胞仪检测细胞凋亡率和Ca2+离子荧光强度，RT-PCR测定p53、NOX4、Bax、Bcl-2 mRNA表达，免疫蛋白印迹法检测p53、NOX4、Bax、Bcl-2、Nrf2、HO-1蛋白表达，免疫荧光法测定p53、NOX4蛋白表达。结果：相较于H/R组，Til组H9c2细胞活力增强(P<0.01)，ROS、LDH、MDA水平下降(P<0.01)，SOD水平上升(P<0.01)，ΔΨm增强(P<0.01)，早期和晚期凋亡细胞降低(P<0.01)，Ca2+荧光强度减弱(P<0.01)，p53、NOX4、Bax的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05，P<0.01)，Bcl-2的mRNA和蛋白表达上升(P<0.01)，Nrf2、HO-1的蛋白表达进一步上升(P<0.01)，p53、NOX4阳性细胞表达减少；单独应用Nutlin-3a后上述效应被削弱，而当加入Til后又不同程度逆转Nutlin-3a的效应。结论：Til对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤具有显著的保护作用，该作用可能是通过调控p53/NOX4通路，抑制氧化应激和凋亡实现。

• 单位
  荆州市中心医院; 第一附属医院药学部; 石河子大学