产角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质

作者：许佳惠; 尹雅洁; 李欣悦; 柳凯; 梁运祥; 赵述淼; 胡远亮^*

来源：华中农业大学学报, 2019, 38(03): 71-76.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2019.03.012

• 角蛋白酶
• 毕赤酵母
• 密码子优化
• 重组
• 表达

将Brevibacillus brevis US575角蛋白酶基因kerUS进行密码子优化,并在毕赤酵母GS115中表达,以提高角蛋白酶产量。结果表明:优化的基因可在毕赤酵母中成功表达,重组角蛋白酶的分子质量约30 ku,最佳反应条件为pH 9.5和60℃,1 mmol/L的Mn2+、Ba2+对角蛋白酶活性有促进作用。此外,重组角蛋白酶易降解干酪素和β角蛋白(羽毛粉),酶促反应最大速度vmax=0.019 g/(L·min),Km=4.64 g/L,比活力=440 U/mg。研究获得的产角蛋白酶重组毕赤酵母具有较好的应用前景。

• 单位
  生命科学学院; 农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学; 湖北师范大学