鸡IFN-β启动子荧光素酶报告载体的构建与活性检测

作者：陈胜利; 唐文雅; 郝华芳; 王兴龙; 刘阳坤; 付向晶; 张鹏; 贺生芳; 杜恩岐; 杨增岐

来源：中国兽医学报, 2013, (06): 878-881.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.06.019

• 鸡β干扰素
• 启动子
• 荧光素酶报告质粒
• Poly(I:C) chicken IFN-β
• promoter
• luciferase reporter gene plasmid
• poly(I:C)

构建并鉴定鸡β干扰素(IFN-β)基因启动子荧光素酶报告基因载体并进行转录活性分析。通过PCR方法从鸡基因组DNA中克隆鸡IFN-β基因启动子,亚克隆到含萤火虫荧光素酶报告基因pGL3-basic载体上,构建鸡IFN-β基因启动子荧光素酶报告基因载体pChIFN-β-luc;用脂质体法将构建的报告基因载体瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,并设置空白对照组和poly(I:C)处理组,检测荧光素酶的活性。经PCR扩增出鸡IFN-β基因启动子序列,双酶切及测序鉴定各重组体构建正确;转染后检测,pChIFN-β-luc具有转录活性,并且在poly(I:C)的刺激下其荧光素酶活性显著升高。本试验为进一步...

• 单位
  西北农林科技大学