摘要
目的 明确微小RNA(microRNA,miRNA/miR)-429是否通过调节缺氧诱导因子(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路来影响子宫内膜异位症子宫内膜基质细胞(ESCs)的增殖、迁移和侵袭。取三峡大学附属仁和医院子宫内膜异位症患者(n=37)标本,作为EM组,并将同期的良性妇科疾病患者(n=37)标本作为对照Con组。将ESCs分为5组:正常内膜组(NC组)、异位内膜细胞组(EM组)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-429组(转染miR-429 inhibitors)、anti-miR-429+Over-HIF-1α组(转染miR-429和Over-HIF-1α过表达质粒)方法 实时定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测miR-429、HIF-1α和VEGF的表达,并分析miR-429与HIF-1α、VEGF mRNA相关性。运用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、划痕实验和Transwell法测定细胞增殖、迁移与侵袭,Western blot检测HIF-1α、VEGF、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)表达。结果 EM组较Con组miR-429表达量,HIF-1α mRNA、蛋白及VEGF mRNA、蛋白水平均显著增加(P<0.05),且miR-429与HIF-1α mRNA及VEGF mRNA表达均呈显著正相关关系(P<0.05)。与NC组相比,EM组、anti-miR-NC组miR-429表达量、HIF-1α、VEGF、N-cadherin蛋白水平、24 h、48 h、72 h的细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白数显著下调(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-429组miR-429表达量、HIF-1α、VEGF、N-cadherin蛋白水平、24 h、48 h、72 h的细胞活力、划痕愈合率、侵袭细胞数显著下降(P<0.05),E-cadherin蛋白数显著升高(P<0.05);与anti-miR-429组相比,anti-miR-429+Over-HIF-1α组以上指标与促进干扰miR-429表达趋势相反。结论 干扰miR-429表达可以下调HIF-1α/VEGF通路活性,进而抑制子宫内膜异位症ESCs的增殖、迁移和侵袭。
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单位三峡大学仁和医院