SP1被鉴定为miR-122-5p的一个转录因子

作者:沈建云; 朱茂英; 费路敏; 陈德宇*
来源:中华男科学杂志, 2021, 27(01): 11-16.
DOI:10.13263/j.cnki.nja.2021.01.002

摘要

目的:miR-122-5p跟精子发生相关,本研究主要是探究miR-122-5p在睾丸内的转录因子。方法:采用生物信息学方法预测到miR-122-5p启动子的可能转录因子为SP1和GATA4,然后分别构建双荧光素酶pGL3-miR-122-5p promoter载体、pcDNA3.1(+)-SP1表达载体和pcDNA3.1(+)-GATA4表达载体,再将pcDNA-SP1+pGL3-basic混合质粒和pcDNA-SP1+pGL3-miR-122-5p promoter混合质粒,以及pcDNA-GATA4+pGL3-basic混合质粒和pcDNA-GATA4+pGL3-miR-122-5p promoter混合质粒分别转入293T细胞,最后用双荧光素酶检测系统检测酶活性。结果:pcDNA3.1+pGL3-miR-122 promoter组的荧光值为0.0362±0.0004,显著高于pcDNA3.1+pGL3-basic组(P<0.05),表明已成功构建小鼠miR-122-5p启动子荧光素酶报告质粒。pcDNA-SP1+pGL3-miR-122-5p promoter组荧光值显著高于pcDNA-SP1+pGL3-basic(P<0.05),结果提示转录因子SP1能够促进miR-122的转录。pcDNA-GATA4+pGL3-basic混合质粒转染组的荧光值与pcDNA-GATA4+pGL3-miR-122-5p promoter混合质粒转染组之间差异不显著,表明GATA4不能增加miR-122-5p转录能力。结论:转录因子SP1能够促进miR-122-5p的转录,GATA4对miR-122-5p没有转录增强能力。

  • 单位
    阜阳师范大学; 食品与生物工程学院