一种山茶刺盘孢Colletotrichum camelliae实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

作者：张晓阳; 程淑媛; 蒋军喜; 陈艳; 黄纪刚; 刘爽; 刘克东; 邱慧芳; 江武; 叶茵; 袁倩; 余玉华; 单崇蕾; 刘家鑫

来源：生物灾害科学, 2024, 47(01): 134-141.

• 茶炭疽病
• 山茶刺盘孢
• 实时荧光定量PCR
• 快速检测

【目的】建立一种快速检测茶树炭疽病病原菌山茶刺盘孢（Colletotrichumcamelliae）的实时荧光定量PCR检测方法。【方法】以茶树炭疽病病原菌山茶刺盘孢（C. camelliae）为检测目标，根据刺盘孢属ApMat基因片段设计特异性引物，建立q PCR检测技术体系，验证引物特异性，测试反应的灵敏度，绘制标准曲线，并采集田间病叶测试检测效果。【结果】设计的四组引物对中，引物对CcF/CcR特异性最好，扩增效率最高；用于定量检测C. camelliae的灵敏度为10 pg/μL,DNA浓度的对数（X）与Ct值（Y）之间的线性关系为Y=-3.529 6X+36.938（R2=0.9957,E=92.01）；该体系检测C.camelliae溶解曲线对应的特异峰值Tm为（85.5±0.5）℃；用该体系在人工接种C. camelliae的病斑组织和田间病叶中检测到了C. camelliae的存在。【结论】建立的q PCR反应体系可特异性定量检测C. camelliae，并可应用于田间病害的早期诊断。

• 单位
  九江市农业科学院; 江西农业大学