抑制受体相互作用蛋白3改善实验性自身免疫性肝炎

作者：刘曼; 张红霞; 张璐; 赵**; 周璐^*; 王邦茂

来源：中华肝脏病杂志, 2022, 30(11): 1231-1236.

DOI：10.3760/cma.j.cn501113-20200819-00466

• 自身免疫性肝炎
• 刀豆蛋白A
• 受体相互作用蛋白3
• 免疫细胞
• 细胞因子

目的评估受体相互作用蛋白3(RIP3)作为自身免疫性肝炎(AIH)治疗靶点的潜力。方法使用免疫荧光法观察AIH肝组织和肝囊肿患者囊肿旁肝组织中RIP3及其下游信号混合谱系蛋白激酶样结构域(MLKL)的活化表达水平。经尾静脉注射刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠急性免疫性肝炎, 并通过腹腔注射RIP3抑制剂GSK872或载体溶剂进行干预。收集外周血和肝组织, 进行血清转氨酶水平测定、qPCR检测和流式细胞分析。组间比较采用独立样本t检验。结果 p-RIP3和p-MLKL是RIP3及其下游信号MLKL磷酸化后的活性形式, 其在AIH患者肝组织中的表达水平显著高于对照者。与对照组相比, AIH患者肝组织内RIP3和MLKL mRNA的表达水平也显著升高(相对表达量3.28±0.29对比0.98±0.09, 4.55±0.51对比1.06±0.11), 差异有统计学意义(t值分别为6.71、6.77, P值均<0.01)。ConA诱导的免疫性肝炎小鼠肝组织中RIP3和MLKL mRNA的表达水平也显著高于对照组(相对表达水平2.35±0.09对比0.89±0.11, 2.77±0.22对比0.73±0.16, t值分别为10.4、6.33, P值均<0.01)。RIP3抑制剂GSK872显著减轻ConA诱导的免疫性肝损伤, 抑制肝脏肿瘤坏死因子-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和NLRP3的表达。与对照组相比, ConA+Vehicle组小鼠肝脏CD45+F4/80+巨噬细胞、CD4+IL-17+Th17细胞、CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞和CD11b+Gr-1+骨髓来源抑制性细胞(MDSCs)比例均显著升高。与ConA+Vehicle组相比, ConA+GSK872组小鼠肝脏CD45+F4/80+巨噬细胞和CD4+IL-17+Th17细胞比例显著下降而具有免疫调节功能的CD4+CD25+Treg细胞和CD11b+Gr-1+MDSCs比例显著升高。结论 AIH患者和ConA诱导的免疫性肝炎小鼠肝组织RIP3信号激活。抑制RIP3降低免疫性肝炎小鼠肝脏促炎因子的表达、减少炎性细胞比例、促进具有免疫调节功能的CD4+CD25+Treg细胞和CD11b+Gr-1+MDSCs在肝脏的积累, 从而减轻肝脏炎症和损伤。因此, 抑制RIP3有望成为治疗AIH的一种新方法。

• 单位
  天津医科大学总医院