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摘要
WRKY转录因子基因家族是植物特有的转录因子，在防御中起着重要作用。通过生物信息学分析，本研究在古四倍体大豆基因组中找到一对同源性高达93%的WRKY33同源基因，并将其命名为GmWRKY33B。从GmWRKY33B两个同源基因保守区域选取一个315 bp片段构建至菜豆豆荚斑驳病毒(bean pod mosaic virus， BPMV)沉默载体(BPMV-VIGS)上，以期同时沉默上述2个GmWRKY33B基因。结果表明，同时沉默两个GmWRKY33B基因并不显著改变沉默植株的表型，但却显著降低了大豆对大豆斑点病菌以及大豆花叶病毒(的抗性，说明GmWRKY33B在大豆免疫反应起正调控作用。激酶分析表明，GmWRKY33B沉默植株中flg22诱导的GmMPK6的磷酸化水平较空载体BPMV-0植株显著降低，说明GmWRKY33B可以通过调控GmMPK6的激酶活性而参与大豆的免疫反应。抗毒素为大豆中主要起防御作用的植保素，而大豆异黄酮类特异性异戊烯基转移酶(Prenyltransferase， PT)基因家族是参与大豆抗毒素生物合成的主要基因，许多PT基因启动子区含有WRKY特异性结合的W-box序列。在Psg侵染条件下，4个所检测的PT基因的表达水平在沉默株系中显著降低，说明GmWRKY33B参与PT基因的转录激活。综上所述，GmWRKY33B通过调控GmMPK6的激活以及调控大豆抗毒素生物合成途径中关键酶编码基因的表达而参与免疫反应。
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单位生命科学学院; 浙江师范大学
