MIAT过表达载体的构建及其对血肿瘤屏障通透性的影响

作者：何珈缘; 王清湲; 许鑫; 周昕欣; 张天元; 马腾^*

来源：解剖科学进展, 2020, 26(01): 10-13.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2020.01.003

• 长链非编码RNA
• 心肌梗死相关转录物载体构建
• 血肿瘤屏障

目的构建长链非编码RNA心肌梗死相关转录物(MIAT)过表达载体pcDNA3.1-MIAT,并研究其对血肿瘤屏障通透性影响。方法从与脑胶质细胞U87共培养的人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3(GECs)提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应技术扩增出MIAT基因片段,通过无缝连接技术克隆到pcDNA3.1载体中进行序列分析,转染重组质粒pcDNA3.1-MIAT到GECs中,real-time PCR检测转染效率,应用跨内皮电阻测量系统和辣根过氧化物酶渗漏实验分析血肿瘤屏障通透性的变化。结果成功扩增出MIAT基因,成功构建pcDNA3.1-MIAT表达载体,Blast序列分析与GenBank中NR00349一致。转染pcDNA3.1-MIAT后,96h转染效率最高,过表达MIAT组跨内皮阻抗值最低,辣根过氧化物酶流量最高,血肿瘤屏障通透性最高。结论成功构建pcDNA3.1-MIAT表达载体,过表达MIAT使血肿瘤屏障通透性升高。

• 单位
  中国医科大学; 辽宁省中医药研究院; 辽宁中医药大学