甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白的分离、纯化和鉴定

作者：胡明冬; 徐剑铖; 周长喜; 冯英凯; 龚传明; 毛宝龄

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2005, (07): 599-603.

• 甲型副伤寒沙门菌
• 鞭毛蛋白
• 鉴定
• AKTAExplorer蛋白纯化系统 Salmonella paratyphi A
• Flagellin
• Identification
• AKTA Explorer protein purified system

目的提纯甲型副伤寒沙门菌鞭毛蛋白并鉴定。方法选用甲型副伤寒沙门菌,经自制的液体培养基扩大培养后,酸裂解法初步分离出鞭毛蛋白,用AKTAExplorer蛋白纯化系统除盐,弱阴离子交换层析纯化。纯化的蛋白用SDS-PAGE、Westernblot和磷钨酸负染扫描电子显微镜(scanningelectronmicrocopy,SEM)观察并摄片鉴定。考马斯亮蓝法测定所获得鞭毛蛋白的产量。结果SDS-PAGE提示纯化的鞭毛蛋白为一条相对分子质量(Mr)为52×103蛋白带;免疫印迹试验亦提示条带在Mr52×103处;SEM观察发现该鞭毛蛋白呈丝状;三者均证实该蛋白为同一均质蛋白。蛋白定量测得每克湿重的...

• 单位
  第三军医大学新桥医院