利用枯草芽孢衣壳蛋白表面展示β-半乳糖苷酶

作者：王贺; 杨瑞金; 华霄; 赵伟; 张文斌

来源：食品与发酵工业, 2012, 38(07): 1-5.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2012.07.019

• 芽孢
• 表面展示
• β-半乳糖苷酶
• Westernblot

分别将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168)芽孢衣壳蛋白CotB、CotC、CotG和CotX的启动子和编码序列与来自嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus IAM11001)的β-半乳糖苷酶基因bgaB进行重组,构建融合表达cotB-bgaB、cotC-bgaB、cotG-bgaB和cotX-bgaB的整合型重组质粒。将4种重组质粒分别转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168(trp-),获得了能在芽孢表面展示的重组菌株PB701、PB702、PB703和PB704。经Western blot检测,4种重组菌株均表达了预期分子量的融合蛋白,初步表明β-半乳糖苷酶被锚定在重组菌株的芽孢表面。以oNPG为底物测定4种重组菌株芽孢表面展示β-半乳糖苷酶的水解能力,得到的酶活分别为0.14、0.06、0.22和0.20 U/mL。

• 单位
  江南大学; 食品科学与技术国家重点实验室