O型FMDV VP1基因的表达鉴定及其多克隆抗体的制备

作者：任宪刚; 薛飞; 朱远茂; 冯军科; 史鸿飞; 高欲燃

来源：中国预防兽医学报, 2009, (07): 568-571.

• 口蹄疫病毒
• VP1基因
• 表达鉴定
• 多克隆抗体制备 FMDV
• VP1 gene
• prokaryotic expression
• preparation of polyclonal antibody

为制备O型口蹄疫病毒(FMDV)VPI抗血清,本研究人工合成了FMDV的VPI基因,并克隆构建了采用PCR方法以pUC57-VP1重组质粒,以其作为模板,经PCR将VPI基因亚克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-VP1。重组质粒鉴定验证后,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE结果显示重组蛋白的分子量约为38ku,以包涵体的形式存在。Westernblot与间接ELISA结果显示重组蛋白能够与FMDV阳性血清反应。进一步将纯化的重组蛋白免疫BALB/c鼠制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1∶1600。本研究为FMDV的其他研究工作提...

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室