脑脊液细菌16S rRNA荧光定量PCR快速诊断儿童化脓性脑膜炎

作者：杨祖钦; 尚世强; 吴亦栋; 杜立中

来源：中国实用儿科杂志, 2007, (03): 192-195.

• 荧光定量聚合酶链反应
• 化脓性脑膜炎
• 脑脊液

目的探讨儿童化脓性脑膜炎(化脑)新的快速诊断方法。方法2003-08—2005-12采用16SrRNA荧光定量法对浙江大学儿童医院49例临床疑似化脑患儿脑脊液(CSF)的细菌DNA进行测定;监测化脑患儿脑脊液细菌DNA拷贝数,同期进行CSF细菌培养的对照。结果(1)荧光定量PCR(FQ-PCR)检测49份脑脊液标本发现17份阳性,阳性率为34.7%(17/49),明显高于脑脊液培养的阳性率10.2%(5/49),差异具有显著性(P<0.01)。(2)对17份FQ-PCR阳性标本进一步测定细菌DNA的拷贝数,发现患儿病情与其DNA拷贝数呈正相关,与其Ct值(指每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数)呈负相关,Ct值越低,脑脊液细菌DNA拷贝数越高,患儿的预后越差。(3)FQ-PCR、CSF细菌培养同时阳性的仅为5例。(4)对2例脑脊液FQ-PCR的产物测序,Ct值17.9的测序提示为大肠埃希菌,符合CSF细菌培养结果;Ct值31.8的,测序未果。结论荧光定量PCR特异性强、敏感性高,需标本量少,是早期快速诊断儿童化脑的可靠方法,具有较大的应用价值。

• 单位
  浙江大学医学院附属儿童医院; 中心实验室; 温州医学院