脑组织外泌体提取、鉴定及脑室注射活体示踪方法建立

作者：王晋晨; 叶樱泽; 钟懿; 古丽娟; 熊晓星^*

来源：卒中与神经疾病, 2020, 27(01): 9-13.

• 外泌体
• 蔗糖梯度离心法
• 脑室注射活体示踪

目的探讨脑组织外泌体提取、鉴定及脑室注射活体示踪方法。方法采用蔗糖梯度离心法,多次离心去除杂质,最终得到纯度较高的脑组织外泌体,采用电镜及western-blot技术对不同密度蔗糖溶液内的外泌体进行鉴定,DiR (1,1’-dioctadecyltetramethyl indotricarbocyanine Iodide)染料标记后在近红外二区仪器下观察脑室注射外泌体后在体内的远程转移情况。结果应用蔗糖梯度离心法进行超高速离心可得到背景较为干净的脑组织外泌体,DiR染料可对外泌体进行标记并显示外泌体在体内转移途径。结论应用蔗糖梯度离心法可成功提取脑组织中外泌体,DiR染料可对外泌体标记并进行活体示踪。

• 单位
  武汉大学人民医院