酸水解法提取-高效液相色谱-质谱法测定乳粉中胆碱的含量

作者：王荣艳; 斯菲菲; 陈青俊; 任一平^*

来源：理化检验. B, 化学分册, 2023, 59(08): 948-952.

• 高效液相色谱-质谱法
• 胆碱
• 乳粉
• 酸水解法提取

取5g乳粉样品，用适量40～45℃水溶解后，用水稀释至100 mL。分取1 mL，与50μL 1 000mg·L-1(以胆碱-1,1,2,2-d4计)氯化胆碱-1,1,2,2-d4内标溶液和10mL 1mol·L-1盐酸溶液混合，于70℃加热3h。冷却后用500g·L-1氢氧化钠溶液调节上述溶液酸度至pH(5.0±0.1)，用水稀释至100mL。分取上述溶液1mL，用体积比95∶5的乙腈和10mmol·L-1甲酸铵溶液的混合溶液稀释至10mL，过0.22μm有机滤膜，滤液供高效液相色谱-单四极杆质谱仪分析。在色谱分析时，以ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱作固定相，以不同体积比的乙腈和10mmol·L-1甲酸铵溶液-甲酸混合溶液(pH 5.0)的混合溶液作流动相进行梯度洗脱；在质谱分析时，以电喷雾离子源正离子(ESI+)模式电离，以选择离子监测(SIM)模式检测，内标法定量。结果显示：胆碱的质量浓度在10.0～200μg·L-1内与对应峰面积与胆碱-1,1,2,2-d4峰面积的比值呈线性关系，检出限(3S/N)为1mg/100g；按照标准加入法进行回收试验，回收率为96.2%～100%；对3个实际样品进行日内、日间精密度试验，胆碱测定值的相对标准偏差分别为0.90%～3.3%(n=11)和1.6%～2.5%(n=9)；方法用于和国家标准GB 5413.20-2013中酶比色法进行比对，15种实际乳粉样品中胆碱测定值的相对误差的绝对值均不大于8.0%。

• 单位
  浙江清华长三角研究院; 浙江公正检验中心有限公司