猪戊型肝炎病毒swCH189株衣壳蛋白基因CP239片段的表达、纯化及抗原性分析

作者：郝宝成; 梁剑平; 兰喜; 刑小勇; 项海涛; 温峰琴; 胡永浩; 柳纪省

来源：中国兽医学报, 2012, (02): 231-237.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2012.02.007

• 猪戊型肝炎病毒
• swCH189株
• 克隆
• 原核表达
• 纯化
• 抗原性分析 E type hepatitis virus
• strain of swCH189
• cloning
• prokaryotic expression
• purification
• antigenicity analysis

根据已克隆的戊型肝炎病毒株swCH189株结构蛋白基因(ORF2)的抗原性及水溶性分析,在其序列上设计套式引物,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2主要抗原基因片段,长度为728bp,将其克隆于PMD18-T载体,测序结果表明插入的片段属于猪戊型肝炎病毒结构蛋白基因ORF2部分;将该片段插入pet32a表达载体,经酶切、测序鉴定证实获得了带有目的基因的重组表达质粒。将重组质粒转化Rosetta菌,经0.3mmol/L IPTG诱导得到融合表达,得到相对分子质量为45 000的重组蛋白,以包涵体形式存在。Western blot分析表明,该蛋白可以与猪戊型肝炎阳性...

• 单位
  甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室