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摘要
目的采用反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列进行检测分析。方法以临床分离的Ⅰ类整合子阳性大肠埃希菌为研究对象,用限制性内切酶HindⅢ对基因组DNA进行酶切,T4 DNA连接酶使酶切产物自身环化,设计Ⅰ类整合酶基因反向引物扩增Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结果临床分离大肠埃希菌中Ⅰ类整合子检出率为68.1%,反向PCR扩增得到1800bp大小的Ⅰ类整合酶基因侧翼序列。结论Ⅰ类整合子在临床分离大肠埃希菌中广泛存在,反向PCR对Ⅰ类整合酶基因侧翼序列检测进一步明确了Ⅰ类整合子的结构,并发现其侧翼序列存在RNA聚合酶基因β亚基,为Ⅰ类整合子调控基因分析及克隆奠定了研究基础。
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