TaqMan-MGB探针检测文森巴尔通体博格霍夫亚种实时荧光定量PCR方法的建立及应用

作者：栗冬梅; 宋秀平; 王君; 刘起勇

来源：微生物学报, 2013, (09): 976-983.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2013.09.006

• 巴尔通体
• 荧光定量PCR
• TaqMan-MGB探针
• 犬
• SCAR标记 Bartonella
• fluorescence quantitative PCR
• TaqMan-MGB probe
• SCAR markers

【目的】应用TaqMan-MGB探针技术,建立具有种水平特异性、高敏感性的荧光定量PCR方法,用于快速检测文森巴尔通体博格霍夫亚种。【方法】在序列特异性扩增区标记(Sequence characterized amplifiedregion,SCAR)技术基础上,依据文森巴尔通体博格霍夫亚种一段特有的基因序列设计探针和引物,分别优化扩增反应的退火温度、探针和引物的反应浓度;分析此方法的特异性、敏感性及重复性;绘制标准曲线,评估PCR反应的扩增效率和稳定性。【结果】本研究设计的TaqMan-MGB探针具有种水平特异性;最低检出限为每个PCR反应11个拷贝;组内和组间的变异系数CV值分别为0.12...

• 单位
  世界卫生组织; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室