复合PCR扩增人mtDNA HVR方法的初探

作者:李琳; 邵金陵; 段小红; 李雪娟; 刘振霞
来源:现代生物医学进展, 2013, (07): 1360-1363.
DOI:10.13241/j.cnki.pmb.2013.07.001

摘要

目的:建立一种高效的扩增线粒体DNA高可变区(mtDNA HVR)的方法。方法:本研究选取5例健康成人静脉血,用人血全基因组DNA试剂盒,提取全基因组DNA,设计引物,用复合PCR方式,对线粒体DNA中的高可变区进行扩增。复合扩增的方式为:用6对套叠引物分开进行两次独立的PCR,扩增mtDNA HVR。第一次扩增用3对引物,目标DNA片段基本涵盖整个线粒体DNA的高可变区,扩增后得到互不重叠的3个短片段,分别为113 bp,126 bp和131 bp。第二次复合扩增用其余的3对引物,目标片段基本重叠在第一次扩增所得的目标片段的区域内,扩增得到3个互不重叠的片段为124 bp,133 bp和93...

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