9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量微孔板蒽酮-硫酸检测方法的建立及验证

作者：刘爱萍; 胡浩; 孔素娟; 李献林; 王晶; 袁菲; 吴兵; 刘方蕾; 赵志强; 谢贵林

来源：微生物学免疫学进展, 2016, 44(03): 1-7.

DOI：10.13309/j.cnki.pmi.2016.03.001

• 微孔板比色法
• 蒽酮-硫酸法
• 9V型肺炎球菌疫苗
• 多糖含量

目的建立微孔板蒽酮-硫酸法检测9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量的检测方法,并对其进行验证和初步应用。方法通过对蒽酮-硫酸方法的改进,建立检测9V型肺炎球菌疫苗中多糖含量稳定可靠的微孔板蒽酮-硫酸法。分别对蒽酮-硫酸法中硫酸溶液浓度、加热时间进行优化,并对建立的方法进行特异性、线性、精密度及准确度的验证。结果最佳硫酸溶液比例为6∶1(浓硫酸∶水),最佳加热时间为10 min。在检测9V型肺炎球菌多糖、多糖衍生物及多糖蛋白结合物中多糖含量时,此方法特异性强;在20120μg/m L范围内,标准曲线线性良好(r2>0.995);实验内及实验间均具有良好的精密度(CV值分别为2.92%3.32%和3.10%4.06%);准确度试验中3个质量浓度的回收率均在96.17%106.63%之间。结论微孔板蒽酮-硫酸法可被用来有效、准确、稳定地检测9V型肺炎球菌多糖、多糖衍生物及多糖蛋白结合物中多糖的含量,该方法较传统蒽酮-硫酸法操作简便快捷,节约样品、试剂等材料,非常适用于相关的疫苗生产过程中的质量控制。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司