美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP可视化快速检测方法的建立与应用

作者：程汝佳; 王林; 栗云鹏; 吴迪; 张玮; 高晓龙; 王培; 李蕊; 杜鹃; 张启龙; 刘海滢; 沈光年; 刘晓冬; 韦海涛; 周德刚^*; 宋彦军^*

来源：中国动物检疫, 2020, 37(06): 94-99.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 美洲型
• 环介导等温扩增技术
• 可视化检测

为建立一种快速诊断美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(NA-PRRSV)的可视化检测方法,根据GenBank已发表的美洲型PRRSV经典病毒株JXA1序列,运用在线生物软件设计合成并筛选出1组引物,通过反应体系优化,建立了NA-PRRSV RT-LAMP可视化快速检测方法,并验证了该方法的特异性、敏感性,同时开展了初步临床应用。结果显示:该方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,可检测病毒RNA模板的最低浓度为10 copies/μL;应用该方法检测30份临床样品,结果与实时荧光RT-PCR方法符合率为100%,进一步证实了该方法的可行性。结果表明,所建立的RT-LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、可视等优点,适用于NA-PRRSV的现场快速检测。本研究为NA-PRRSV的快速、准确鉴别提供了有效手段。