pGC-FU-存活素慢病毒表达质粒的构建

作者：高斯媛; 甘厦; 郭威; 武泽光; 宁琴; 齐俊英

来源：肝脏, 2011, 16(06): 452-456.

DOI：10.14000/j.cnki.issn.1008-1704.2011.06.003

• 肝功能衰竭
• Survivin
• pGC-FU Liver failure
• pGC-FU

目的构建pGC-FU-survivin慢病毒质粒,旨在下一步实验中利用survivin蛋白的表达影响原代肝细胞的增殖。方法从高表达survivin的小鼠淋巴瘤细胞株YAC-I中获取存活素(survivin)基因,连接到pcDNA3.1(+)质粒上,双酶切及双向测序鉴定。构建pGC-FU-survivin慢病毒载体,从基因水平和蛋白质水平鉴定含有survivin的目的片段表达。经包装、纯化,获得效价较高的病毒颗粒进行下一步生物学功能研究。结果双酶切及测序证实从YAC-I中获得的survivin基因连接到pcDNA3.1(+)质粒上,除第317位碱基由腺苷酸突变为胸腺嘧啶外,其余均与NCBI基因文...

• 单位
  昆明市第三人民医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院