摘要
为完善湖南油菜根肿病的监测预警体系,分析油菜根肿病的发生与芸薹根肿菌休眠孢子量的关系,防止湖南油菜根肿病进一步蔓延。本研究依据芸薹根肿菌ITS序列设计了一对特异性引物,通过制备标准质粒构建了快速、精准的实时荧光定量PCR检测方法。其检测灵敏度为3×10-10μg/μL,比常规PCR高100倍;利用建立的方法检测了来自湖南各地土壤样品中芸薹根肿菌的休眠孢子数量,64份土样中的休眠孢子含量基本大于104个/g,所检测的土样中孢子含量最高为2.22×107个/g。据实地调查,当土壤中休眠孢子数量大于104个/g时,油菜发生根肿病的风险较大,休眠孢子含量较高的田块其发病程度也较为严重。结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法能对油菜根肿病进行早期诊断,为湖南油菜根肿病发生的监测预警提供有效技术参考。
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