miR-145通过靶向抑制SMAD3的表达抑制非小细胞肺癌细胞侵袭能力

作者：何高燕; 罗晓斌^*; 赵勇; 罗丽

来源：现代肿瘤医学, 2021, 29(01): 26-31.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2021.01.006

• miR-145
• 非小细胞肺癌
• SMAD3
• 侵袭

目的:探讨miR-145靶向调控SMAD3的表达对非小细胞肺癌细胞侵袭能力的影响。方法:采用qRT-PCR检测miR-145和SMAD3在30例非小细胞肺癌组织和癌旁组织中的表达水平并分析其相关性。利用靶基因预测网站预测miR-145的潜在靶基因SMAD3,利用双荧光素酶报告基因实验验证。利用细胞转染实验对非小细胞肺癌A549细胞进行了miR-145 mimics、miR-145 inhibitor、siRNA SMAD3及其相关对照的细胞转染,采用Transwell实验检测转染后A549细胞侵袭能力的变化。使用Western blot检测上调或下调miR-145表达对A549细胞中SMAD3蛋白表达的影响。结果:qRT-PCR结果显示,非小细胞肺癌组织中miR-145低表达,SMAD3高表达,且两者表达水平呈负相关。靶基因预测及验证实验结果显示miR-145可以与SMAD3的3’-UTR特异性结合,SMAD3是miR-145的靶基因。Western blot结果显示,转染miR-145 mimics可以显著降低SMAD3蛋白的表达水平(P<0.001),转染miR-145inhibitor则显著提高SMAD3蛋白的表达水平(P<0.01)。Transwell体外侵袭实验结果显示,与对照组相比,转染miR-145 mimic显著降低了A549细胞的侵袭能力(P<0.001),转染miR-145 inhibitor显著提高了A549细胞的侵袭能力(P<0.05);与对照组相比,敲低SMAD3的表达A549细胞的侵袭能力减弱(P<0.001);与单独敲低SMAD3相比,共同转染siRNA SMAD3和miR-145 mimics A549细胞的侵袭能力减弱(P<0.05),共同转染siRNA SMAD3和miR-145 inhibitorA549细胞的侵袭能力无显著差异(P>0.05)。结论:miR-145在非小细胞肺癌组织中低表达,miR-145通过靶向抑制SMAD3的表达发挥对非小细胞肺癌细胞侵袭能力的抑制作用,为临床综合治疗提供了新的作用靶点。

• 单位
  遂宁市中心医院