摘要
本发明涉及一种生姜外泌体的制备方法及应用,属于生物技术领域。制备操作如下:(1)将生姜去皮洗净,切成小块状,榨汁并将汁液分离;(2)采用差速高速离心法,将收集的汁液在4℃下差速高速离心分离,去除沉淀;结合聚乙二醇沉淀法,将上清液加入相应量的聚乙二醇溶液,旋涡混匀,在4℃下孵育、离心、沉淀纳米颗粒;(3)将纳米颗粒悬浮,过滤,纯化柱纯化,收集纯化液,即得到生姜外泌体。生姜外泌体的粒径为120~192 nm,生姜外泌体的表面负电荷为-31.6~-21.6 mV,生姜外泌体的蛋白浓度为2391.43±750 ng/μL。生姜外泌体在肠细胞中的有效内化作用主要与巨胞饮和小窝蛋白介导的内吞作用相关,有效抑制LPS诱导的肠细胞中NF-κB和炎症细胞因子的过度表达,有望抑制或缓解肠道炎症。
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