摘要
目的建立测定牡丹花粉破壁率及其2种单萜苷含量的HPLC法,同时比较不同类型花粉在相同提取条件下2种单萜苷的含量差异。方法采用细胞计数法,以完整花粉个数为评价指标,测定牡丹花粉的破壁率。色谱条件:Globalsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);流动相:乙腈(A)-1 mL·L~(-1)甲酸溶液(B)。梯度洗脱:0~3 min,84%B~81%B;3~8 min,81%B;8~11 min,81%B~79%B;11~21 min,79%B;21~40 min,70%B~60%B。流速:1.0 mL·min~(-1);柱温:35℃;检测波长:240 nm;进样量:10μL。结果牡丹花粉粒可在显微镜下观察清晰,花粉粒个数与花粉的质量呈正相关,在0.002 1~0.006 1 g·mL~(-1)范围内线性关系良好,可用于牡丹花粉显微计数。牡丹花粉经破壁后的破壁率为89.16%。芍药苷和氧化芍药苷分别在质量浓度为6.3~202.8(r_1=0.999 9)和6.4~205.8μg·mL~(-1)(r_2=0.999 8)范围内与各自峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.78%和99.56%,RSD值分别为1.23%和1.27%;精密度、稳定性和重复性实验的RSD值均小于3.0%。经同一方法处理后,2种类型花粉中氧化芍药苷含量相差不大,而芍药苷含量有显著差别。结论利用细胞计数法测定牡丹花粉破壁率方法简单、稳定;其液相方法准确、可靠,重复性好,可用于牡丹花粉中芍药苷和氧化芍药苷的定量分析;破壁对花粉中有效成分的溶出起到促进作用。
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