摘要
目的 探讨维生素D(VD)在细颗粒物(PM2.5)诱导A549人肺泡上皮细胞发生自噬过程中的作用及对上皮细胞因子产生的影响。方法 燃烧器的乙炔扩散火焰上部采集制备PM2.5,采用PM2.5体外处理A549细胞,并给予VD或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理。Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)及beclin-1的表达,实时荧光定量PCR检测A549细胞白细胞介素25(IL-25)、 IL-33及胸腺间质淋巴细胞生成素(TSLP)的mRNA表达,透射电镜观察自噬体的形成。结果 PM2.5导致A549细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ比值、 beclin-1蛋白表达增加,自噬体形成增多,给予VD处理后,PM2.5诱导的细胞自噬水平降低;在3-MA抑制A549细胞自噬水平后,PM2.5仍可诱导细胞自噬,且VD依然可逆转PM2.5诱导的自噬;PM2.5通过诱导自噬促进A549细胞分泌IL-25、 IL-33及TSLP,而3-MA及VD可抑制该过程。结论 VD抑制PM2.5诱导的A549细胞自噬及细胞因子释放,发挥保护作用。
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单位西安交通大学第一附属医院; 中国人民解放军空军军医大学; 西安交通大学第二附属医院