杭白菊总黄酮通过下调miR-384-5p抑制MPP+诱导的SK-N-SH凋亡及氧化应激

作者：刘拥军; 李向前; 张小雪; 李鹏^*

来源：热带医学杂志, 2022, 22(12): 1641-1665.

• 杭白菊总黄酮
• miR-384-5p
• +" name="keyword">MPP+
• 细胞凋亡
• 氧化应激

目的 探讨杭白菊总黄酮对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)凋亡和氧化应激的影响及可能机制。方法 利用2.5 mmol/L MPP+诱导SK-N-SH细胞建立细胞损伤模型，MPP+诱导SK-N-SH细胞的同时加入0.1、0.2、0.4 mg/mL杭白菊总黄酮或(和)转染miR-384-5p模拟物(mimics)，将加入杭白菊总黄酮的SK-N-SH细胞分为对照组(正常培养)、MPP+组、MPP++杭白菊总黄酮低剂量(0.1 mg/mL)组、MPP++杭白菊总黄酮中剂量(0.2 mg/mL)组和MPP++杭白菊总黄酮高剂量(0.4 mg/mL)组，将转染miR-384-5p mimics的SK-N-SH细胞分为MPP++miR-384-5p组、MPP++杭白菊总黄酮组和MPP++杭白菊总黄酮+miR-384-5p组。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，蛋白质印迹法检测细胞中活化的半胱天冬酶-3(Cleavedcaspase3)蛋白表达，相应试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平、细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，RT-qPCR检测miR-384-5p表达。结果 与对照组比较，MPP+组SK-N-SH细胞光密度(OD)值和SOD活性降低，细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、LDH漏出量、细胞中MDA和miR-384-5p表达升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)；与MPP+组比较，MPP++杭白菊总黄酮低、中、高剂量组SK-N-SH细胞OD值和SOD活性依次升高，细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、LDH漏出量和细胞中MDA和miR-384-5p表达依次降低，差异均有统计学意义(P均<0.05)，且杭白菊总黄酮呈剂量依赖性。与MPP+组比较，MPP++miR-384-5p组SK-NSH细胞OD值、SOD活性降低，细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、LDH漏出量和MDA含量升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)；与MPP++杭白菊总黄酮组比较，MPP++杭白菊总黄酮+miR-384-5p组SK-N-SH细胞OD值、SOD活性降低，细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达、LDH漏出量、MDA含量升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 杭白菊总黄酮可靶向下调miR-384-5p来抑制MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡和氧化应激。