微小牛蜱Bm91基因的克隆及其真核表达载体的构建

作者：王玙; 曾巧英; 罗建勋; 马米玲; 关贵全; 殷宏

来源：甘肃农业大学学报, 2009, (01): 21-26.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2009.01.027

• 微小牛蜱
• Bm91基因
• 真核表达载体 Boophilus microplus
• Bm91 gene
• recombinant eukaryotic expression vector

参照GenBank中收录的微小牛蜱Bm91基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物,从我国微小牛蜱半饱血雌性成蜱肠道和唾液腺研磨物中提取总RNA,利用M-MLV RTase cDNA Synthesis Kit合成双链cDNA,并采用PCR技术扩增获得的Bm91基因,将其克隆到pGEM-T Easy载体中并进行PCR、酶切和测序分析鉴定.结果表明:所克隆的Bm91基因序列与GenBank上收录的Bm91基因序列的同源性达97.1%,而且该片段含有完整的开放阅读框;将该基因从克隆载体上用EcoRⅠ单酶切消化并亚克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pP1C9K的EcoRⅠ酶切位点,再次进行PCR、酶切...

• 单位
  甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室