组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)抑制剂通过抑制核因子κB减轻乙醇诱导的人肠上皮Caco-2细胞损伤

作者：任莉^*; 贾皑; 任牡丹; 卢桂芳; 冯云; 和水祥^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(09): 800-805.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008904

• 组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)
• 乙醇
• 肠上皮细胞
• 炎症
• 通透性
• 核因子κB (NF-κB)

目的研究组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)在酒精诱导的肠上皮细胞炎症和通透性中的作用和机制。方法培养Caco-2细胞达到分化,采用(10、 25、 50、 100、 200) mmol/L乙醇对其进行处理,通过噻唑蓝(MTT法)检测乙醇对细胞活性的影响,实时定量PCR检测Caco-2细胞HDAC3 mRNA水平, Western blot法检测其蛋白水平,从中筛选出适宜的乙醇浓度。将分化的Caco-2细胞分为对照组、乙醇组(50 mmol/L乙醇处理60 min)和RGFP966预处理组(乙醇处理前用2μmol/L HDAC3抑制剂RGFP966预处理1 h)。ELISA检测培养的细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,电阻仪检测跨上皮电阻值(TER), Western blot法检测细胞中闭合蛋白(occludin)、密封蛋白1(claudin-1)以及磷酸化的核因子κBp65 (p-NF-κBp65)、核因子κB抑制蛋白(IκB)的蛋白水平。结果 (10、 25、 50)mmol/L乙醇对细胞活力无明显影响,这些浓度的乙醇处理后HDAC3 mRNA和蛋白表达均升高,且具有剂量依赖性。与对照组相比,乙醇处理组细胞TNF-α含量和p-NF-κBp65蛋白水平增加, TER值与occludin、 claudin-1和IκB蛋白水平均降低;与乙醇处理组相比, RGFP966预处理组细胞TNF-α含量和p-NF-κBp65蛋白水平均降低, TER值与occludin、 claudin-1和IκB蛋白水平均增加。结论抑制HDAC3能够减弱乙醇诱导的肠上皮细胞炎症和通透性,可能是通过抑制NF-κB的活化发挥作用的。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院