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摘要
以芽孢杆菌BC4菌株为对象，通过对其铬抗性相关基因chr A的克隆表达来测定其编码蛋白ChrA还原Cr(Ⅵ)的能力以及该蛋白在芽孢杆菌Cr(Ⅵ)去除中的作用，可帮助进一步阐明芽孢杆菌与Cr(Ⅵ)的作用机理，并为芽孢杆菌应用于铬污染治理奠定理论基础。PCR扩增出芽孢杆菌BC4菌株铬抗性相关基因chr A,PCR产物经克隆与测序，得到chr A完整的DNA序列。该序列大小为1182bp，共编码393个氨基酸，预测编码蛋白分子量为43kDa。根据利用NCBI所进行的BLAST序列比对结果，判断该基因为铬转运蛋白编码基因。将chr A基因PCR产物双酶切后连接到表达载体pET28b并转化进大肠杆菌BL21中，对其表达产物进行分析。结果表明，chr A基因在大肠杆菌BL21中表达约43kDa的蛋白，与预期结果相符；重组菌株对Cr(Ⅵ)的耐受能力高于对照菌株，说明ChrA蛋白在芽孢杆菌BC4的Cr(Ⅵ)抗性机制中起重要作用，且重组菌株对Cr(Ⅵ)具备较强的抗性。
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