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摘要
目的：观察平喘颗粒对巨噬细胞补体D因子（CFD）表达水平及其介导的自噬的影响，从而明确其抑制巨噬细胞M2型极化的作用机制。方法：采用白介素-4诱导U937细胞构建M2型巨噬细胞模型并给予平喘颗粒含药血清进行干预，分别以Western blot、RT-qPCR及免疫荧光法检测CFD的表达水平。以慢病毒转染CFD-shRNA及自噬诱导剂雷帕霉素作为对照，分别采用Western blot、RT-qPCR和流式细胞术巨噬细胞中M2型极化标记分子、自噬相关蛋白及CFD的表达水平，透射电镜观察巨噬细胞自噬小体的数量。结果：与模型组比较，平喘颗粒组显著降低U937细胞中CFD、Arg-1、FIZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞百分比（P<0.01）。而在CFD-shRNA稳转U937细胞中加入CFD重组蛋白后，Arg-1、FIZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞数与模型组比较无显著性差异。与模型组比较，平喘颗粒组Beclin1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低（P<0.01）,p62蛋白表达水平显著增加（P<0.01）。在CFD-shRNA稳转U937细胞中加入CFD重组蛋白后，自噬标记蛋白的表达水平与模型组比较无显著性差异。平喘颗粒+雷帕霉素组Arg-1、FIZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞数量显著高于平喘颗粒组（P<0.01）。结论：平喘颗粒可通过抑制CFD的表达水平进而抑制巨噬细胞的自噬水平，从而抑制巨噬细胞的M2型极化。
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单位黑龙江中医药大学; 黑龙江省中医药科学院
