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摘要
目的探讨二甲肼对大肠上皮细胞的作用和基因表达谱改变影响。方法以前期建立的永生化正常大肠上皮细胞为模型,采用软琼脂克隆形成实验探讨二甲肼的诱导转化作用,并用基因芯片技术揭示转化过程中的基因谱变化,实时荧光定量PCR和Western blot技术进行验证。结果经二甲肼作用后大肠上皮细胞在软琼脂中出现细胞克隆,与正常对照细胞比较,转化细胞有265个基因表达发生明显改变,包括148个上调基因和117个下调基因。分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)在转录和蛋白水平上均发生明显上调。结论二甲肼能诱导永生化正常大肠上皮细胞发生恶性转化,初步揭示了转化过程中基因表达谱的改变,为认识大肠癌发生的分子机制提供了有益线索。
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单位浙江大学医学院附属第二医院; 杭州市滨江医院
