摘要
目的研究蜕膜巨噬细胞经外泌体调控滋养细胞生物学行为参与不明原因复发性流产的作用机制。方法采集从2018年1月~2019年2月于我院接受诊治的50例URSA患者蜕膜组织,记作实验组。另取同期于我院进行人工流产的50例孕早期女性蜕膜细胞组织作为对照组。以免疫磁珠法完成巨噬细胞的分选。借助透射电镜观察蜕膜巨噬细胞形态,以Western blot法检测外泌体标记蛋白CD63的表达。采用荧光显微镜观察外泌体是否可被滋养细胞所摄取。将两组不同蜕膜巨噬细胞外泌体和滋养细胞HTR8/Snveo共培养,以MTS法检测培养1~3d时HTR8/Snveo细胞的活力。采用Transwell迁移实验检测共培养3d后HTR8/Snveo细胞的迁移能力。结果在透射电子显微镜下观察发现,外泌体的形状为椭圆形,直径在40~80nm之间,且经Western blot法检测结果发现,蜕膜巨噬细胞外泌体存在明显的CD63高表达。将经PKH67染色处理的蜕膜巨噬细胞外泌体和滋养细胞HTR8/Snveo共培养,在荧光显微镜观察下发现:HTR8/Snveo胞质内存在荧光,提示了外泌体可被滋养细胞所摄取。实验组蜕膜巨噬细胞外泌体共培养2d、3d时的HTR8/Snveo活力低于对照组(均P<0.05)。实验组HTR8/Snveo细胞迁移数少于对照组(P<0.05)。结论蜕膜巨噬细胞经外泌体对滋养细胞的活力以及迁移能力均产生不同程度的抑制作用,继而可能引起胚胎的发育停止,进一步达到介导URSA发生的目的。
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