下调miR-488靶向促进Jag1表达抑制缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤的机制研究

作者：赵荫涛^*; 裴小鑫; 刘源; 徐亚威; 彭猛; 杨海波

来源：中华医学遗传学杂志, 2021, 38(12).

• 缺氧复氧
• 心肌细胞
• miR-488
• 凋亡
• 氧化损伤

目的探讨下调miR-488靶向Jag1对缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤的影响。方法构建缺氧复氧心肌H9c2细胞损伤模型, 转染miR-488 inhibitor。分别用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖的凋亡, 分别用试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)和过氧化氢酶(catalase, CAT)的水平, 用Western印迹检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)蛋白表达的差异。预测miR-488的靶基因, 并用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系。在心肌H9c2细胞中共转染miR-488 inhibitor、Jag1 siRNA, 给予缺氧复氧处理, 检测细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达。结果缺氧复氧心肌H9c2细胞中miR-488表达升高, 细胞增殖活性降低, 凋亡增多, Bax蛋白表达升高, Bcl-2表达降低, MDA水平升高, CAT、SOD水平降低, 细胞培养液上清中LDH升高。转染miR-488 inhibitor使经缺氧复氧处理的心肌H9c2细胞中miR-488表达降低, 细胞增殖活性升高, 凋亡减少, Bax蛋白表达降低, Bcl-2蛋白表达升高, MDA水平降低, CAT、SOD水平升高, 培养液上清中LDH水平降低。下调miR-488靶向负调控Jag1表达。Jag1 siRNA可逆转miR-488 inhibitor对缺氧复氧心肌H9c2细胞增殖、凋亡和LDH、SOD、MDA、CAT水平以及Bax、Bcl-2蛋白表达作用。结论下调miR-488靶向Jag1可减轻缺氧复氧心肌H9c2细胞的损伤。

• 单位
  郑州大学; 第一附属医院心血管内科