哈氏弧菌(Vibrio harveyi)lexA基因的克隆与原核表达

作者：常云胜; 周维; 高增鸿; 丁燏^*

来源：基因组学与应用生物学, 2018, 37(10): 4315-4321.

DOI：10.13417/j.gab.037.004315

• 哈氏弧菌
• lexA
• 基因克隆
• 原核表达

LexA是调节SOS反应的阻遏蛋白,而且与细菌耐药性的形成密切相关。本研究以水产养殖经济动物的条件致病菌哈氏弧菌ZJ0603基因组DNA为模板,设计同源引物克隆出SOS基因lexA,并对lexA基因进行了生物信息学分析;构建了lexA基因的原核表达载体PGEX-lexA,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达成功,还对LexA蛋白表达的诱导温度、时间、IPTG浓度等条件进行了优化。结果表明,lexA基因的开放阅读框为621 bp,编码206个氨基酸,LexA蛋白理论分子量为22.68 kD;重组蛋白表达的最优条件为37℃、0.04 mmol/L IPTG诱导6 h。

• 单位
  广东海洋大学; 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室; 广东省水产经济动物病害控制重点实验室