电穿孔法基因转染悬浮细胞条件的优化

作者：沈慧玲; 陈子兴; 王玮; 段卫明; 傅建新

来源：苏州大学学报(医学版), 2004, (1): 40-43.

DOI：10.3969/j.issn.1673-0399.2004.01.012

• 电穿孔
• 悬浮细胞
• 基因转染
• 优化

目的以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因优化悬浮培养的白血病细胞的电穿孔转染条件.方法通过控制电压、电容、细胞状态、温度及缓冲液等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒GFP转入悬浮培养的人白血病细胞株K562和NB4,用流式细胞仪和荧光显微镜观察转染率.结果 (1)低电压、高电容能高效转染悬浮培养的人白血病细胞,细胞类型不同条件有所差异,K562细胞在250 V、950 μF得到最大转染率

• 单位
  苏州大学附属第一医院