大鼠ATPase a3基因siRNA筛选及慢病毒载体构建

作者：杜文喜; 童培建; 吴承亮; 方剑利; 姜月艳; 刘慧

来源：浙江中医药大学学报, 2011, (02): 218-221+225.

DOI：10.16466/j.issn1005-5509.2011.02.047

• 大鼠
• ATPasea3基因
• RNA干扰
• 慢病毒 rat
• ATPase a3 gene
• RNA interference
• Lentivirus

[目的]设计、筛选大鼠破骨细胞(osteoclast,OC)骨吸收关键基因ATPase a3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)并构建其慢病毒表达载体,为研究以OC亢进的骨代谢疾病奠定基础。[方法]设计ATPase a3基因siRNA序列并合成小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)结构的DNA,退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切慢病毒pGCL-GFP载体连接,构建成携带ATPase a3-shRNA慢病毒质粒载体(pGCL-ATPase a3-shRNA),PCR及测序鉴定后,Western blot筛选出携带最佳siR...

• 单位
  浙江省中医院; 浙江中医药大学