人呼吸道合胞病毒F1蛋白的原核表达及纯化

作者：傅生芳; 寇桂英; 包红; 姜英; 陈汉泉; 余黎; 周旭

来源：中国生物制品学杂志, 2011, (08): 873-876.

DOI：10.13200/j.cjb.2011.08.6.fushf.001

• 呼吸道合胞病毒
• 人
• F1基因
• 克隆
• 分子
• 原核细胞
• 基因表达
• 纯化 Respiratory syncytial virus
• human
• F1 gene
• Cloning
• molecular
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Purification

目的克隆A型人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)兰州分离株F1基因,并进行原核表达和纯化。方法采用RT-PCR方法克隆RSV F1 ORF序列,克隆至pET-42b(+)表达载体,构建重组原核表达质粒pET-42b-F1,转化大肠杆菌Rossata(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,用GST亲和层析树脂进行纯化。结果重组原核表达质粒经双酶切及测序证明构建正确;表达的融合蛋白相对分子质量约77 000,表达量约占菌体总蛋白的20%,以包涵体和可溶性两种形式存在;该蛋白可与鼠抗人RSV...

• 单位
  兰州生物制品研究所