原代人眼Tenon’s囊成纤维细胞的生物学特性及体外培养方案优化

作者：王丽君; 李宏松; 张文怡; 廖丁莹; 杨熹婷; 王建明^*

来源：临床眼科杂志, 2020, 28(06): 551-555.

• 原代成纤维细胞
• Tenon’s囊
• 原代培养

目的优化原代人Tenon’s囊成纤维细胞(HTFs)体外分离、培养的实验方法,并对体外培养的HTFs的生长特性进行观察。方法采用优化的组织块贴壁法培养原代HTFs;倒置显微镜观察HTFs的基本形态特征;免疫荧光染色Vimentin及Cytokeratin对所培养的原代细胞进行鉴定;采用噻唑蓝比色试验检测细胞增殖活性及生长曲线;流式细胞术检测细胞周期及增值指数。结果组织块贴壁后4～7 d可以见长梭形细胞长出,2～3周后可传代。细胞生长曲线近似"S"形,MTT法显示在第3～5 d细胞增殖能力显著。免疫荧光染色Vimentin阳性率达98%,Cytokeratin阴性,符合HTFs特性且无上皮细胞污染。第3～4代HTFs中(63.48±10.22)%处于G0/G1期,(10.80±5.07)%处于G2/M期,(24.34±8.07)%处于S期,HTFs的增殖指数为35.6%,细胞增殖良好。结论建立了一种简单、经济、有效的获取原代人Tenon’s囊成纤维细胞的方法,为研究青光眼滤过泡瘢痕化提供了可靠的靶细胞模型。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院